1533年6月1日，安妮·博林加冕为英格兰王后。凯瑟琳被褫夺王后的称号，并幽禁在一个下等庄园里。玛丽·都铎也因此被贬为私生女，不被允许和母亲见面。1533年9月，安妮·博林生下女儿伊丽莎白，也就是后来的“童贞女王”伊丽莎白一世。同样是因为安妮没有生出儿子，亨利八世又将自己的心思转移到了安妮的女侍官珍·西摩的身上。1536年，亨利八世下令逮捕安妮·博林和她的弟弟子爵乔治。乔治被指控和他的三名朋友私通安妮·博林，并计划暗杀国王。乔治和他的朋友被处死，而安妮·博林则被判定与自己的弟弟通奸，并被幽禁在了伦敦塔。1536年5月19日安妮被斩首。亨利八世宣告自己和安妮·博林的婚姻无效。